菜豆是我國及世界重要的食用豆類之一,具有品種繁多,表型特征差異大,基因組小和繁殖周期短等特點,是研究豆科植物基因功能的重要資源。黃金勾作為我國北方的優(yōu)良菜豆品種深受歡迎,其突出特點是肉厚,纖維少,營養(yǎng)豐富。研究團隊通過輻射誘變,構(gòu)建了黃金勾突變體庫。在3500株M3代單株株行中,生育期(開花期與成熟期),葉部性狀,株型,育性及豆莢或種皮顏色等性狀都表現(xiàn)出豐富的變異。
野生型黃金勾的豆莢隨著生長快速褪綠變黃,而在突變體庫中出現(xiàn)較高比例的綠色豆莢突變體,該突變體的豆莢顏色一直保持綠色。為研究黃金勾豆莢褪綠及類黃酮營養(yǎng)成分的變化,對3個發(fā)育階段的豆莢進行了轉(zhuǎn)錄組和代謝組測序。隨著豆莢的發(fā)育,葉綠素含量不斷降低,在野生型黃金勾中下降速率更快。對葉綠素代謝通路分析發(fā)現(xiàn),葉綠素降解基因紅色葉綠素降解產(chǎn)物還原酶(RCCR)在黃金勾綠色小豆莢中高表達,而在綠色豆莢突變體中其表達量極低,推測該基因是黃金勾豆莢褪綠的關(guān)鍵基因。另一方面,綠色豆莢突變體豆莢質(zhì)地較硬,烹飪口感差,通過對纖維素含量進行測定,發(fā)現(xiàn)綠色豆莢突變體中纖維素含量顯著高于野生型。且與野生型相比,綠色豆莢突變體中葉纖維素合成基因表達量上調(diào)。通過豆莢代謝組研究,共檢測到154種類黃酮物質(zhì),且隨著豆莢發(fā)育,多數(shù)類黃酮物質(zhì)含量降低。在黃金勾中,柚皮苷,牡荊素-2-O-鼠李糖苷,異槲皮甙,槲皮素,山奈酚,紫云英苷和芒柄花苷含量較高。而木犀草素,芹菜素,李屬異黃酮,鷹嘴豆素,黃顏木素在綠色豆莢突變體中含量較高。該研究從生理和分子水平揭示了黃金勾豆莢褪綠的機制,并對豆莢發(fā)育過程中類黃酮物質(zhì)進行代謝分析,為解析營養(yǎng)物質(zhì)變化提供理論基礎(chǔ)。
本研究得到了國家重點研發(fā)項目,先導(dǎo)專項及國家自然科學(xué)基金等項目的資助。
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圖1 野生型與綠莢突變體豆莢顏色變化模式圖