主要農作物均已進(jìn)入了后基因組時(shí)代, 種子純度及品種鑒別、基因組的功能研究及分子育種均需要進(jìn)行基因型鑒定。建立簡(jiǎn)便、快速及無(wú)損種子連續取樣技術(shù)流程及基因型鑒定的技術(shù)體系, 可節省種植成本與鑒定周期,強化植物基因功能研究及提高分子育種的效率。 

　　近日，中國科學(xué)院東北地理與農業(yè)生態(tài)研究所夏正俊課題組在《植物學(xué)報》上發(fā)表題為“快速、無(wú)損大豆種子連續取樣技術(shù)及其DNA制備”的技術(shù)論文，為種子純度及品種鑒別及分子設計育種提供了技術(shù)支撐。本技術(shù)利用微型電鉆和空氣泵等簡(jiǎn)單裝置巧妙地設計了一個(gè)連續無(wú)損鉆取大豆種子的操作流程,當鉆頭鉆至種子的胚乳部分時(shí), 左手將移液槍頭的粗端置于鉆頭下, 槍頭管收集約5.85–9.75 mg的大豆種子的胚乳組織。本技術(shù)特點(diǎn)為可連續取樣，經(jīng)過(guò)訓練每人每天可鉆取的植物種子組織樣品數量約為 1500~2300 粒（相當于 4~6 塊 384孔樣品板）,與現有的鉆孔法相比,效率得以顯著(zhù)提高。同時(shí)，所獲得的樣品不需要研磨，可直接用于下游的DNA提取，基因型鑒定。該技術(shù)可用于多種植物的品種鑒別、基因定位、分子輔助育種及分子設計育種等研究領(lǐng)域。 

圖1 種子鉆孔和樣品采集過(guò)程。中間部分為整體流程簡(jiǎn)圖, 種子取樣經(jīng)鉆取、轉移及清潔3個(gè)部分, 然后再進(jìn)入下一個(gè)種子的鉆取。 (A)–(B) 種子鉆取： (A)種子組織的鉆取, (B) 移液槍頭收集種子組織; (C)–(D) 種子樣品的轉移： (C) 鉆取的種子組織轉移至384深孔板中, (D) 一行轉移后貼膠帶保護; (E)–(F) 清潔： (E) 鉆頭的清潔, (F) 移液槍頭及手套的清潔; (G) 鉆孔后的大豆種子; (H) 鉆孔豆種子播種后14天的幼苗 

　　夏正俊研究員為本文的第一與通訊作者，李玉卓碩士研究生、朱金龍、吳紅艷、徐坤、翟紅等本文的共同作者。 

　　本研究得到了中國科學(xué)院重點(diǎn)部署項目、中國科學(xué)院戰略性科技先導專(zhuān)項(A 類(lèi))及國家自然科學(xué)基金等項目資助。

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